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&使用方法
1. 储存液的配制
使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简单低速离心使溶液降至管底。之后用13ul高质量无水DMSO溶解MitoSOX Red,混匀后即得到5mM储存液。
2. 真核活细胞标记步骤
(1)制备5uM MitoSOX Red工作液:用HBSS/Ca/Mg或适当缓冲液稀释储存液到5uM工作液。
(2)细胞加载:取1-2ml 5uM MitoSOX Red工作液以覆盖爬片培养的细胞为准。37℃避光孵育10min。
(3)细胞清洗:用预热的缓冲液轻轻清洗细胞3次。
(4)准备观察:按需加入复染剂染细胞,之后封片,进行荧光成像。
试剂信息
英文名称:MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator
中文名称:红色线粒体超氧化物荧光探针
分子式:C43H43N3IP
分子量: 759.71
激发波长:396nm
发射波长:610nm
溶解性: 溶于DMSO
纯度:≥95%
储存条件:-20℃避光干燥
&核心机制
MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide Indicator 是一种高度特异性的荧光探针,用于检测活细胞线粒体内的超氧化物。
其工作原理基于化学结构设计、亚细胞器靶向性、特异性氧化反应及荧光信号生成四个核心环节,具体机制如下:
1. 化学结构基础与靶向机制
MitoSOX Red 的分子结构由两部分构成:
二氢乙啶核心:作为荧光发色团,可被超氧化物氧化后产生荧光。
三苯基膦阳离子 :通过己基链与HE连接,赋予探针线粒体靶向性。
靶向机制:
TPP基团携带正电荷,且被三个亲脂性苯基包围,使其能高效穿透细胞膜。
线粒体膜电位为负电荷环境,通过静电吸引作用驱动TPP富集于线粒体基质中。
此特性使探针在细胞内选择性积累于线粒体,而非其他细胞器。
&相关试剂
Daminozide
MitoTracker Green FM
MitoTracker Deep Red FM
MitoTracker Red CMXRos
Fura Red,AM,Cell Permeant
S-Nitrosoglutathione(GSNO)
Dihydroethidium(DHE)二氢乙锭
MitoSOX Red Mitochondrial Superoxide
Reactive Oxygen Species(ROS)Assay Kit
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
Dimethyl Sulfoxide(DMSO),Cell Culture Tested
西安强化生物科技有限公司xxn对以上内容进行了系统整理!
本试剂用于科研领域,其他用途概不适用!
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